大规模的转录组研究者正在迅速阐述在特定细胞种类当中何时何地隐含与神经信念癌症相关的基因。理解和治疗法这些癌症的分析方法将并不需要载体和操纵特定小小脑亚型的分析方法。因此，在非有机体灵长类动物和有机体当中接触这些年轻人已变得至关重要。重组腺相关病毒（rAAVs）是在神经系统当中顺利进行基因传递信息的首选分析方法，对特定的小小脑人群没有内在的胺类。系统的增强子找到之前通过准许以单细胞分辨率顺利进行转录组和一般说来遗传学研究者的技术的最近发展而得到慢速。但对于增强子选收的跟踪内部空间仍然很大。为了集当中我们的增强子选收，编者选收专门研究者Scn1a的调节态势，Scn1a是在各有不同小小脑人群当中隐含的基因，其破坏与严重的高血压病相关。结合用于易位易位染色质测序（scATAC-seq）数据的单细胞测定与跨种群的多肽方向性独创，编者在该基因临近参选者了十个候选调节多肽。编者已确定了三种增强子，协同载体隐含Scn1a的小小脑人群的内涵。其当中，一种特定的短调节多肽尽可能将病毒隐含限制为隐含PV的皮质当两边小小脑（PV cIN）。
分析方法：四名受测者（两名成年人/两名女性，成年22-57岁）放弃了一项外科手术，切除了当神经递质组织（小脑部和海燕体）以治疗法小脑膜炎高血压。在所有的流感当中，每个与会者都曾放弃过一次更进一步的手术，安放硬鞘下和/或深度电极顺利进行咽检测，以已确定高血压猝死的位置。从海燕和小脑部收300μm薄片，在海燕薄片当中，病毒的载体是基底鞘南中国。在感染病毒后7～14d对培养的人薄片顺利进行电生理记录。将培养的人薄片转移到记录寝室。对固有鞘和发光特性顺利进行归纳。果蝇分别保持良好在17.8–26.1℃和30–70%的一个系统环境温度和潮湿以内。这些参数被密切关系检测和控制在灵长目散居寝室。从麻省理工学院（MIT）的人群当中获得了一只雌性普通狨兔（6岁大概）。成年（2岁）雄性猕兔（macacamulatta）来自加利福尼亚州大学戴维斯理工学院的加利福尼亚州东欧国家灵长类动物研究者当中心。在动物模型小脑薄片器（Zivic Instruments）上顺利进行突起薄片，并在冰冷的人工甲状腺肿液体（ACSF）当中法医学V1皮质。经过处置后，使用使用Nova-Seq S2 100循环试剂盒（Illumina）顺利进行测序。
结果：在正常或病理发展只能（都有Dret综合征）健康检查回路萌芽的以前快照的主要持续性是，在不使用转基因动物的只能无法转回特定的细胞种类。即使采用复杂的遗传策略，年轻的PV cIN也很难成为抗病毒。顾及它们的丰度（它们代表所有抑制性cIN的40％）并且出现得相对较晚。更广为地说，在本研究者当中已确定的增强子备有了兼具特殊临床意义的小小脑人群的访问途径。最值得注意的是，这些增强剂可以通过基因药物或恒定小小脑活性而潜在地用于大大降低Dret综合征的衰呕吐。编者归功于均匀分布和浑身施用可用于有效的病毒传递信息到当神经递质。通过均匀分布施用，可能会改善局灶性高血压，PFC功能持续性或海燕记忆持续性。相比之下，系统性过渡到病毒可用于并不需要年底默许的只能，例如，纠正普遍性高血压猝死或信念病和神经退行性癌症。编者的研究者表明，对调节锕系元素的严苛鉴定为治疗法环境当中特定细胞种类的获收备有了红线。重要的是，归功于我们的增强子选收分析方法可推广到其他基因。总体而言，我们找到了都由七个针对各有不同小小脑人群和当神经递质周边地区兼具独特抗原的增强剂。即使采用了严苛的规格（对目标年轻人的胺类> 90％），我们的分析方法仍兼具显着的成功率（> 20％）。此外，正如离地保守的多肽所预见的那样，编者测试的增强偏序在都有有机体在内的所有种群当中被显然兼具同等的胺类和正确性。
Vormstein-Schneider, D., Lin, J.D., Pelkey, K.A. et al. Viral manipulation of functionally distinct interneurons in mice, non-human primates and humans. Nat Neurosci (2020).
相关新闻
相关问答
